實驗背景

       合成的皮質(zhì)類固醇，簡稱為DEX，其具有抗炎及抗過敏的效果，其能抑制結(jié)締組織的增生，降低毛細(xì)血管和細(xì)胞膜的通透性，減少炎性滲出，抑制組織胺和其他毒性物質(zhì)的形成與釋放，能促進蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變成糖，減少糖的利用；其主要應(yīng)用于各種炎癥、嚴(yán)重感冒、傳染病、過敏性疾病、風(fēng)濕、休克、代謝疾病及引產(chǎn)，但是長期使用，容易導(dǎo)致水腫、低血鉀、肌萎縮、骨質(zhì)酥松、脫鈣、病理性骨折、糖尿、幼畜sheng產(chǎn)停滯等。因此各國嚴(yán)格禁止地塞米松作為生長激素使用，同時限制此藥物用于動物源性食品中，我國及歐盟規(guī)定牛奶中的地塞米松的大殘留*為0.3ug/kg，日本肯定列表中的牛奶中的殘留*為0.02mg/kg。   安譜實驗一直密切關(guān)注動物源性食品安全，為食品安全保駕護航，本次安譜實驗參考國標(biāo)GB/T22978-2008《牛奶和奶粉中地塞米松殘留量的測定-液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法》，在10ppb加標(biāo)水平上，回收率在90%以上，重現(xiàn)性好，滿足國標(biāo)檢測要求。

接下來，小編帶大家走進安譜實驗室
一起來學(xué)習(xí)具體檢測方案吧~

一、牛奶樣品處理

樣品提取：

取10g樣品（精確到0.01g）置于離心管中，（加標(biāo)濃度：500ppb，100uL，使得上機檢測濃度為10ppb），加入20ml乙腈，渦旋混勻1min,以5000r/min離心10min。取上清液至梨形瓶中，旋轉(zhuǎn)（水浴45℃）減壓蒸發(fā)，至體積小于5ml.待上樣。

小柱操作：

SBEQ-CA0853  CNWBOND HC-C18 SPE 小柱  500mg，3mL/50PCS

• 活化：3mL乙腈

• 平衡：3mL水

• 上樣;  全部待上樣液

• 淋洗：用5mL水洗滌容器瓶后上小柱淋洗,淋洗完抽干小柱

• 洗脫：5mL乙腈

• 濃縮：洗脫液45℃水浴氮吹干，5mL流動相復(fù)溶后，過膜上機測試

   

   

二、儀器條件

01液相條件

色譜柱：Athena C18（2.1*100mm，1.8um）梯度設(shè)置：

流速：0.2mL/min

柱溫：40℃

進樣量：20ul

02質(zhì)譜參數(shù)

離子源：ESI

掃描方式：正離子模式

檢測方式：MRM

電離電壓：5000V

離子源溫度：300℃

霧化溫度：200℃

定性離子對（m/z）393.2/373.2；393.2/355.2

定量離子對（m/z）393.2/373.2

碰撞能：12ev

注：地塞米松在APCI上響應(yīng)較低，改用ESI；并優(yōu)化了流動相梯度

三、實驗譜圖

 圖1. 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線（5、10、50ppb）

 圖2. 牛奶基質(zhì)空白提取離子色譜圖

圖3. 溶劑標(biāo)液（10ppb）提取離子色譜圖

圖4. 牛奶基質(zhì)加標(biāo)（10ppb）提取離子色譜圖

四、實驗數(shù)據(jù)

五、實驗耗材