CNW C18柱測定乳及乳制品中三聚氰胺

CNW C18柱測定乳及乳制品中三聚氰胺

a)      三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品：

標(biāo)樣濃度：5.25ug/ml

峰面積：187.5

b）奶粉樣品中三聚氰胺

奶粉樣品。

峰面積：98.02

如圖所示，采用己烷磺酸鈉作為離子對試劑，奶粉中的雜質(zhì)出峰在三聚氰胺之前，并且分離度較大，*不影響三聚氰胺的測定。而采用庚烷磺酸鈉作為離子對試劑，奶粉中雜質(zhì)出峰在三聚氰胺之后，可能影響分離。另外，采用其他色譜柱不一定能夠*分離三聚氰胺和干擾物質(zhì)。

方法如下：

1. 標(biāo)準(zhǔn)樣品配置：

稱取100mg的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶液融解并定容于100mL容量瓶中，該溶液濃度為1mg/mL。使用時(shí)，用HPLC流動(dòng)相稀釋至所需濃度。

2. 提取：

稱取5mL（固體樣品2g）試樣，準(zhǔn)備加入9mL 流動(dòng)相，加入1mL乙酸鉛溶液。搖勻，40-50℃下超聲提取20min。靜止2min，取上層提取液約10mL轉(zhuǎn)入離心管，在10000r/min離心機(jī)離心5min。

3. SPE小柱凈化：

分別用3mL甲醇，3mL水活化Anpelclean^TM MCX混合型陽離子交換萃取柱，準(zhǔn)確移取3mL標(biāo)準(zhǔn)品/樣品溶液（固體樣品則為2ML樣品溶液/標(biāo)準(zhǔn)品溶液）上柱，控制過柱速度在1mL/min以內(nèi)（或按樣品重力過柱）。再用3mL 0.1M鹽酸，3mL甲醇洗滌，抽近干（或按溶劑重力滴干）后用5mL 5％氨水甲醇溶液洗脫。洗脫液50℃氮?dú)獯蹈桑瑴?zhǔn)確加入流動(dòng)相1mL，40-50℃下超聲溶解后過0.22或0.45µm濾膜，上機(jī)測定。

4. 液相色譜條件：

色譜柱：CNW C18柱

流動(dòng)相：稱取2.02g己烷磺酸鈉（或庚烷磺酸鈉）和2.10g檸檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度。取該溶液900mL加入100mL乙腈。

柱溫：40℃。

流動(dòng)相流速：1.0mL/min。

檢測波長：240nm。